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Virologica Sinica, 32 (6) : 465, 2017
Research Article
乙肝病毒高效感染分化的hNTCP稳转的Huh7细胞系
1病毒学国家重点实验室,武汉病毒研究所,中国科学院,武汉,中国
2 深圳市异种移植工程技术中心,国家-地方联合工程实验室,深圳市第二人民医院,深圳大学第一附属医院,深圳,中国
3 广东省器官捐献与移植重点实验室,免疫研究所,中山医学院,中山大学,广州,中国
 Correspondence: wucc@wh.iov.cn
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摘要
研究乙型肝炎病毒(HBV)感染的完整生命周期,包括病毒进入的早期步骤,需要高效的细胞感染模型。二甲基亚砜/聚乙二醇(DMSO / PEG)的耐受性、Na+牛磺胆共转运多肽(hNTCP)表达水平以及细胞分化状态是影响HBV感染是否成功的重要限制因素。在本研究中,我们使用了一株肝癌细胞株(Huh7DhNTCP)来克服这些限制因素,它对HBV感染具有良好的易感性。为了实现这一目标,我们使用不同的Huh7肝癌细胞株在2.5% DMSO / 4%PEG条件下进行测试,从而获得一株具有抵抗力的细胞株(Huh7D),并进一步利用重组慢病毒系统构建稳定表达hNTCP的细胞株(Huh7DhNTCP)。随后,我们对Huh7DhNTCP细胞在有无DMSO处理的条件下细胞形态特征和分化相关标记进行了鉴定,并对Huh7DhNTCP细胞的HBV易感性进行评估。研究结果表明,Huh7D细胞耐受2.5% DMSO / 4% PEG8000,而其它细胞无此耐受性。本研究建立的Huh7DhNTCP细胞可以高水平表达hNTCP,并在DMSO诱导下迅速转化为一种非分裂、分化良好的细胞表型。Huh7DhNTCP细胞支持HBV感染的整个生命周期。这种细胞培养系统可能有助于分析宿主-病毒的相互作用,并助于研发抗病毒药物和疫苗。
Received: 24 Mar 2017  Accepted: 17 Jul 2017  Published online: 29 Sep 2017
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