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Virologica Sinica, 33 (2) : 131, 2018
Research Article
广东地区猪δ冠状病毒的分离鉴定及致病性分析
1 中山大学生命科学学院,有害生物控制与资源利用国家重点实验室;
2 广东温氏食品集团股份有限公司,温氏研究院
 Correspondence: caoych@mail.sysu.edu.cn
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摘要
猪δ冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus, PDCoV)是近年来新出现的一种猪肠道冠状病毒。感染PDCoV的新生仔猪出现腹泻、脱水、呕吐症状,病死率高,严重危害我国养猪业的发展,也对全球养猪业造成巨大经济损失。PDCoV自2012年第一次在香港被检测到,随后在美国、韩国、泰国、越南、老挝、中国内地如江西、湖南也相继有报道。本研究利用LLC-PK细胞从广东地区某猪场严重腹泻仔猪内容物中分离到一株PDCoV毒株,命名为CHN-GD-2016。分离毒株可以被PDCoV特异性抗血清识别,而且通过透射电镜可以观察到明显“皇冠”样病毒粒子。接着对分离到的PDCoV毒株进行全基因组序列测定、遗传进化分析,结果显示该毒株与中国大陆大多数毒株在同一分支,而且与CHN/Tianjin/2016毒株亲缘关系最近。进一步将分离的毒株与GenBank上参考毒株进行同源性比较,结果发现CHN-GD-2016毒株与其他毒株具有很高的核苷酸相似性,达97.2%-99.5%;其中与CHN/Tianjin/2016毒株核苷酸相似性最高,达99.5%。此外,对CHN-GD-2016毒株S基因进行分析,发现该毒株S基因与中国大陆大多数分离毒株一样存在3个核苷酸缺失。以上结果说明,CNH-GD-2016毒株与中国大陆其他PDCoV毒株可能具有相同的来源。最后用10 mL病毒滴度为1×104 TCID50/mL病毒液口服感染新生仔猪,相较于对照组,攻毒组出现明显呕吐、脱水、严重腹泻症状。攻毒后连续7天均可以检测到仔猪排毒,而且对攻毒仔猪进行解剖、组织病理学分析,可以观察到小肠肠壁变薄、肠绒毛脱落等典型PDCoV病变,小肠免疫组化分析也可以检测到PDCoV。综上所述,本研究成功在广东地区分离到一株PDCoV 毒株,为研究PDCoV的遗传演化、致病机理奠定了基础;同时为研制PDCoV疫苗提供了重要的科学参考。
Received: 20 Jun 2017  Accepted: 22 Nov 2017  Published online: 22 Mar 2018
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