Hello guest, Register  |  Sign In
Virologica Sinica, 33 (2) : 173, 2018
Research Article
小麦矮缩病毒基于单克隆抗体的血清学检测方法
1 浙江大学 水稻生物学国家重点实验室 生物技术研究所, 杭州 310058,中国
2 中国农业科学院 植物病虫害生物学国家重点实验室 植物保护研究所,北京 100193,中国
 Correspondence: zzhou@zju.edu.cn;wujx@zju.edu.cn
(2186.05KB)  
摘要
由小麦矮缩病毒(Wheat dwarf virus, WDV)引起的小麦矮缩病目前在中国小麦种植区广泛存在并引起严重的小麦产量损失。为了建立检测WDV可靠、有效的血清学方法,从WDV感染小麦植物中克隆的病毒衣壳蛋白基因(CP)在大肠杆菌中进行蛋白表达,表达的重组蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,并利用杂交瘤技术获得4株分泌抗WDV单抗的杂交瘤细胞株系(18G10、9G4、23F4 和 22A10)。以制备单抗为核心建立检测小麦植物中WDV的ACP-ELISA和dot-ELISA两种血清学方法。其中,以单抗23F4或22A10为基础建立的ACP-ELISA具有最高的检测灵敏度,其检测感染WDV小麦植物粗提液的灵敏度达到1:163,840倍稀释(w/v, g/ml)。而在建立的4种dot-ELISA中,以单抗23F4为核心建立的dot-ELISA具有最高的检测灵敏度,其检测感染WDV小麦植物粗提液的灵敏度达到1:5,120倍稀释(w/v, g/ml)。128个从中国陕西和青海省小麦种植区采集的田间小麦样品利用建立的两种血清学方法进行WDV检测。调查结果表明大约62%的小麦样品感染了WDV。小麦田间样品的PCR检测及PCR产物的DNA测序和序列比对结果验证了这两种血清学方法检测结果的准确性。因此,我们认为制备的WDV单抗及建立的两种血清学检测方法对控制我国WDV的发生具有重要作用。
Received: 30 Oct 2017  Accepted: 30 Jan 2018  Published online: 9 Apr 2018
Home |  Resources |  About Us |  Support |  Contact Us |  Privacy |  Powered by CanSpeed | 
Copyright © 2015 Virologica Sinica. All rights reserved