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Virologica Sinica, 33 (3) : 270, 2018
Research Article
基于微滴式数字PCR和RT-qPCR建立高灵敏度和准确性的寨卡病毒核酸检测方法
南方医科大学
 Correspondence: zhangb@smu.edu.cn;zhaowei@smu.edu.cn
(1693.57KB)  
摘要
建立寨卡病毒高灵敏度检测方法有助于实现疾病控制过程的早期检测,减少严重神经并发症的发生。本研究建立了基于NS5基因的寨卡病毒核酸检测微滴式数字PCR(micro-droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)和RT-qPCR(real-time quantitative PCR)方法。利用寨卡病毒质粒标准品进行测试,RT-qPCR结果表明,Ct值在101到108copy/μL范围内线性关系较好,R2为0.999,扩增效率为92.203%。而当浓度低至101copy/μL以下时,RT-qPCR方法无法检测。而ddPCR在100到104copy/μL范围内线性关系良好,可以检测浓度低至1copy/μL的样品。对于寨卡病毒临床样品,RT-qPCR适用于较高浓度样品(101copy/μL以上),ddPCR可以准确灵敏的检测极低浓度样品(101copy/μL以下)。因此ddPCR方法可以应用于寨卡病毒早期诊断、实验室研究和监测工作中。
Received: 7 Mar 2018  Accepted: 23 May 2018  Published online: 14 Jun 2018
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