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1987年02卷4期

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Review

单纯疱疹病毒小鼠腹腔感染模型—耐受性与耐受机理的探讨

张兴权

1987, 2(4): 1

单纯疱疹病毒小鼠腹腔感染模型已广泛用于抗病毒防御机制,抗病毒化疗和抗病毒免疫治疗等项研究中。该模型虽则简单易行,但小鼠对感染反应性不同,有的敏感,有的耐受,这不仅牵涉到病毒免疫学基本理论,而且左右具体试验结果。本文就影响耐受性的因素及耐受性产生的机制做一简要介绍。

单纯疱疹病毒2型3万道尔顿结构蛋白的纯化及其特性研究

秦克锋, 汪美先, 姜绍谆, 马文煜

1987, 2(4): 8

用抗HSV-2型特异性单克隆抗体CH-A9与Sepharose 4B偶联制备免疫吸附柱,以亲和层析的方法,从HSV-2感染的BHK细胞膜上纯化了一种HSV-2特异的结构蛋白(VP30)。实验表明,该结构蛋白的主要特性有:第一,分子量为30,000道尔顿;第二,具有HSV-2型持异性;第三,可在小鼠体内诱发中和抗体。

应用免疫粘附血凝技术检测流行性出血热病毒抗原和抗体的试验研究

董关木, 罗惠容, 刘文雪, 陈明, 俞永新

1987, 2(4): 14

本文对免疫粘附血凝(IAHA)技术进行了改进并用于检测流行性出血热病毒搞原和血清效价。比较了不同毒株在Vero-E_6细胞内抗原滴度,表明A_9株的滴度最高达1:64,以IAHA法对出血热病人9份血清,3份恢复期血清和家兔免疫血清6份进行了效价测定。并同时用免疫荧光(IFA)法进行比较,结果抗体阳性率二种方法一致,但前者的抗体滴度和增长倍数较后者高2-64倍,以上结果表明IAHA法可代替IFA法用于出血热病人或感染动物的抗体检测。

无环鸟苷(Acyclovir)治疗慢性乙型肝炎追踪观察(附10例报告)

熊开钧, 王心禾, 黄华芳, 姚梦林, 金慰鄂, 曾令兰, 张雪珍

1987, 2(4): 18

无环鸟苷治疗HBsAg高滴度慢性病人和携带者成人10例,并与保肝药治疗,情况相似成人10例对照观察,经一年追踪,30天间歇组6例,停药后3个月才有3例HBeAg和DNA-P转阴,9个月有2例回升,一年时,5例病毒指标与治疗前相似,其中4例HBV-DNA阳性,有1例全部病毒指标(包括HBV-DNA)持续转阴。 30天连续治疗4例,病毒指标继续转阴,以第6~9个月最好,HBsAg转阴1例,HBeAg4例全部转阴,有2例出现-HBe,HBcAg阳性3例有2例转阴和DNA-P阳性均转阴。对照组均无转阴。10例一年观察,3例无效,4例病毒指标暂时转阴,3例病毒复制指标持续转阴,连续疗法病毒转阴时间比间歇法长。无环鸟苷是目前用于疱疹病毒感染有效的抗病毒新药,治疗疱疹脑炎其疗效明显优于阿醣腺苷,1982年weller和Smith分别报道治疗慢性乙型肝炎,对病毒复制有暂时抑制效果。1984年我们开始对HBsAg高滴度慢性病人和病毒携带者成人10例,进行了抗病毒治疗研究,并与同期用保肝药、病情相似的成人10例对照,发现连续治疗的近期效果优于间歇治疗组和对照组,经一年追踪观察,并补做了血清HBV-DNA,报道如下:

影响风疹病毒血凝和血凝抑制试验若干因素的研究

李初梅, 顾方舟, 陈伯权

1987, 2(4): 22

对大量制备高效价风疹病毒(RV)血凝素问题进行研究发现,每日更换RV感染细胞维持液可获得大量高效价血凝素。试验用Auletta液稀释血凝素、PH6.2、ca~(++)、Mg~(++)。离子浓度各0.1%时血凝滴度最高。比较两种处理血清中非特异性凝集抑制物的方法,发现高岭土法和肝素—氯化锰法结果相似。用此两种方法同时检测107份孕妇血清,结果符合率达98%。但高岭土法更为简便经济。

单克隆抗体治疗日本乙型脑炎的实验研究

张明杰, 汪美先, 姜绍谆, 马文煜

1987, 2(4): 27

本文应用JEV-McAb对感染JEV的小白鼠及幼山羊进行实验性治疗,并对乙脑免疫机理作一初步探讨。结果表明,JEV-McAb对经不同途径感染各种JEV毒株的小白鼠都有较好的保护作用,其效果明显优于PeAb。小鼠感染后120小时,大部分已发病,个别已濒死,这时给予混合MeAb或其F(ab′)2,仍可保护约半数存活。McAb对感染JEV的幼羊也有较好的保护作用。羊脑内注入JEV48小时后,出现发热不安等症状,这时由腹腔和椎管两种途径同时给予混合McAb,保护率达100%。存活实验动物脑组织内未分离出病毒;而死亡功物病毒分离阳性,脑组织经双PAP及HE染色证实JEV抗原阳性并伴有脑炎的病理改变。中和活性是JEV-McAb的主要保护方式,中和放价高的MeAb保护率也高。

小剂量干扰素对慢性乙型肝炎抗病毒治疗的追踪观察

黄华芳, 熊开钧, 王心禾, 金慰鄂, 曾令兰, 吴章琦

1987, 2(4): 34

本文对40例曾经小剂量干扰素治疗、疗程达6个月的慢性乙肝患者进行治后6~20个月的追踪观察。从HBV标志物阴转率来看,抗病毒远期疗效结果为HBeAg治前19例阳性中,12例阴转(63.1%),其中6例并出现抗-HBe转阳。DNA-P治前3例阳性中,2例阴转(66.6%)。HBcAg治前2例阳性者也阴转。HBV-DNA治前3例阳性者仅一例阴转。HBsAg 39例阳性中,7例阴转(17.9%)。其中HBeAg及DNA-p阴转率较突出,分别为63.1%及66.6%。再从抗病毒综合反应来看,远期总有效率达57.5%(23/40),其中3例在治后14、15及20个月观察时:HBsAg、HBeAg、HBcAg、DNA-P及HBV-DNA均阴性。对照组20例HBsAg、HBeAg及DNA-P阴转率分别为0%、22.2%及0%。可见并非自然阴转,而是药物作用所致。由此认为小剂量干扰素对抗慢性乙肝病毒远期疗效是可取的,值得深入研究。

流行性出血热病原学的研究——Balb/c乳鼠感染病毒后鼠脑、鼠肺超微结构的观察

隋文作, 王世和, 高俊峰, 脱朝伟, 于淼, 宋桂芹, 金俐, 明彩荣, 李永明, 何亦祥, 李忠羲, 刘江秋, 温青莉

1987, 2(4): 39

Balb/c乳鼠用标准病毒(EHF)H8278感染后取鼠脑、鼠肺进行电镜观察,结果证明:在鼠脑及鼠肺细胞内均发现有病毒,病毒特点:呈园形或椭园形,单位膜结构清楚,内含有比较疏松的丝状或颗粒状结构,单位膜外有微突。病毒的大小在90~120mm之间。此外在细胞浆内并发现有包涵体。

用微载体悬浮培养大量生产高活性鼠干扰素

肖成祖, 张呤庵, 孔惟惟, 王宏霞

1987, 2(4): 43

用自制的MC-1型微载体进行悬浮培养,当其浓度为5mg/ml时,可较好地用以培养和增殖鼠L929细胞。当接种细胞量为30×10~4/ml左右时,一般在3天即可增殖至1×10~6细胞/ml。用25IU/ml鼠IFN起动12—24小时,用NDV作诱生剂,并采用环己亚胺(20μg/ml)和放线菌素D(2μg/ml)进行超诱导,IFN产量可高达1×10~6IU/ml左右,比活接近1.3×10~5IU/ml蛋白。尽量去除培养基,加胰酶—柠檬酸盐消化和高速搅拌,使细胞从载体上分离,再加新鲜培养基和微载体的方法进行扩大生产看来是可行的。这些实验表明采用微载体悬浮培养细胞的技术将更适于IFN的工业化生产。

油桐尺蠖核型多角体病毒杀虫剂的安全检测

曾云添, 汤显春, 甘普祥, 沈瑞菊

1987, 2(4): 49

本文报道了油桐尺蠖核型多角体病毒杀虫剂不同剂型和标准样品的细菌学检测,没有分离、培养到志贺氏菌、沙门氏菌、耶尔森氏菌、炭疽菌、弧菌、大肠杆菌、化脓性球菌等致病细菌。并用不同剂型口服和注射感染小白鼠,观察了其体表症状及内脏病理变化,结果表明:该杀虫剂不引起致突变作用,对人畜是安全的。

苜蓿花叶病毒(AMV)白三叶草分离物-Wc的研究

魏宁生, 李毅

1987, 2(4): 54

在西北农业大学校园内的白三叶草上分离到Wc分离物。该分离物经汁液摩擦接种莱豆和豇豆只产生局部坏死斑,在烟草上为系统侵染。致死温度为55℃,体外保毒期为12—24小时,稀释限点为10~(-2)—10~(-3)。琼脂双扩散试验表明Wc分离物与AMV抗血清有明显的沉淀反应。部分提纯制品在电镜下有5种形态:宽度一致(18—20nm),长度分别为58、52、41和31nm,第5种粒子近球形。病毒粒子经3%凝胶电泳,染色扫描后有4个峰。超速离心分析有4个主峰,其沉降系数分别为S_(20.w)=98s(B组份),82s(M组份),72s(T_b组份),和65s(T_a组份)。鉴定结果表明Wc是AMV的一个分离物。降解病毒所得总核酸(未变性)经聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了4种核酸的分子量如下:RNA_1=1.3×10~6,RNA_2=1.0×10~6,RNA_3=0.8x10~6,RNA_4=0.3×10~6。

TMV弱毒DN60—3的诱变及其对番茄花叶病的保护效果试验

郑贵彬

1987, 2(4): 62

为获得TMV弱毒,在选择轻症纯毒系的基础上,以亚硝酸诱变处理30、40、50、60分钟,得到了30个无症突变株,经室内交叉保护试验,其中DN60-3对TMV的重花叶株系、条斑株系和山东济南的坏疽型都有显著的干扰作用,而对生产影响不大的黄色花叶株系和黄色环斑株系的干扰作用差。田间试验示范结果,对保护地栽培的番茄花叶病(包括卷叶病)的防病增产效果明显。同时发现,栽培技术差,植株长势弱,则保护放果减低。由于弱毒的保护作用属于持异性免疫,因此,在弱毒应用上,对TMV和CMV混发地区的露地番茄无保护作用。随着抗TMV番茄品种的全面推广,弱毒的利用将会失去重要性,目前一些中小城市番茄品种正处于更新时期,弱毒仍可发挥一定作用。

荧光底物在酶联免疫吸附试验中的应用

于善谦, 张若平

1987, 2(4): 69

碱性磷酸酶底物,对硝基酚磷酸二钠(PNPP),在酶联免疫吸附试验(ELISA)中已普遍使用。本实验用一种荧光底物,4-甲基聚缴花酮磷酸酯做间接ELISA反应(FS-ELISA),同前者进行了比较。当用0.1ml的黄瓜花叶病毒(CMV),浓度为0.1ng/ml包被时,在紫外光下仍可看到反应所产生的荧光。FS-ELISA对CMV测定的敏感度比用PNPP底物时高100倍。最后对该方法用于定性和半定量检测抗原的问题进行了讨论。

噬菌体定量检测青枯假单胞杆菌(Pseudomonas solanacearum)方法的研究——Ⅱ 噬菌体ZP-2对土壤含菌量测定的研究

莫寅元, 任欣正, 方中达

1987, 2(4): 73

采用噬菌体技术对人工接种土壤的青枯假单胞杆菌姜瘟菌株进行测定,结果表明,在每克土含10~3菌落形成单位(CFU)的情况下,回收率为57.4%,检测的敏感性较高,在每克土含10~2(CFU)的条件下也能测到活菌数。因此,这种方法是一种快速、简便、有前途的方法。

从一次新生小牛腹泻流行中分离到牛轮状病毒

苏诚钦, 吴亦伦, 陈云华, 何丽娜, 董光锋

1987, 2(4): 79

1985年3月下旬,合肥市某牛奶场发生了一次新生牛非细菌性腹泻流行。用MA104细胞从牛_1粪便标本中分离到一株牛轮状病毒。电镜检查为典型轮状病声形态。在MA104细胞上第三代开始呈现胞浆内颗粒状荧光并产生细胞病变(CPE)。PAGE核酸电泳图型与牛轮状病毒NCDV株完全一致。经ELISA鉴定属A群轮状病毒。

免疫酶标(ELISA)法检测宫颈癌妇女阴道分泌物中HSV抗体的研究

陈文凯, 程丽, 郭淑芳, 向近敏

1987, 2(4): 83

应用免疫酶标ELISA法检测宫颈癌阴道分泌物中HSV抗体,其阳性率为85.7%,HSV-2抗体滴度的几何均值为57.98、与非宫颈癌组妇女比较,阳性率及抗体滴度的几何均值均存在显著差异,提示宫颈癌患者生殖道HSV的高感染率。

生物素-抗生物素系统免疫酶法用于乙型肝炎“e”系统检测的研究

罗肇敏, 何祥旺

1987, 2(4): 86

近年来生物素-抗生物素系统(Biotin-Avidin-System)在免疫学技术中的应用,日益为国内、外学者所重视。这一技术的使用,大大提高了方法的灵敏度,为微量抗原和抗体的检测开辟了新的途径。我们在探讨这一新的技术中,运用标记抗生物素和生物素法(LAB法),检测乙型肝炎e系统,初步获得良好的效果,现报道如下:

用琼脂双扩散法检测马铃薯卷叶病毒(PLRV)

王人元, 吕文清

1987, 2(4): 89

马铃薯卷叶病毒(PLRV)早已在1916年发现,但由于植株体内病毒的浓度极低,提纯十分困难,使得血清学检测的研究进展很慢。1974年日本Murayama等首次制备了高效价的抗血清,也仅能与提纯的病毒制剂起反应。以后瑞士GugerIi、荷兰Maat等、美国Clarke和Hepp等以及张鹤龄等虽也相继制备出抗血清,但均不能用琼脂双扩散法进行检测,必须将病毒进行提纯或半提纯后才能见到反应沉淀线,

油茶尺蠖核型多角体病毒的分离及电镜观察

孟小林, 刘年翠

1987, 2(4): 92

油茶尺蠖(Biston marginata Shirabi)属鳞翅目,尺蠖科,是危害油茶树的主要害虫。近年来,油茶尺蠖已迁移到茶园中,在湖南、湖北等地猖獗成灾,现已成为危害茶树的主要害虫之一。油茶尺蠖一年有几代,而且世代重叠,加之对化学农药具有较强的抗性,给茶叶生产带来了重大经济损失。