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1988年03卷2期

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Review

人类乳头瘤病毒及其与子宫颈癌关系的研究进展

仇素英

1988, 3(2): 111

1932年Shope首先发现棉尾兔(CottontailRabbit)的乳头瘤由病毒引起,用疣浸液注射野兔或家兔能引起疣,部分患疣家兔发展为癌。该病毒是第一个哺乳动物致癌病毒的模型,称棉尾兔乳头瘤病毒(CottontailRabbitPapillomaVirus,CRPV)。以后相继从羊、鹿、牛、马、狗等动物也分离到此病毒。此外,还从鶸类(Chaffinch)分离到禽类的乳头瘤病毒。

轮状病毒生物学性状的研究

郭进林, 吴惠联, 韩文清, 孟红, 张凤竹, 李德荣, 黄祥瑞, 黄志尚

1988, 3(2): 118

对最常应用的3个轮状病毒(RV)标准株(人的Wa株,牛的NCDV株,猴的SA_(11)株)进行了形态学、培养特性及理化性质的比较观察与检测。它们在MA_(104)细胞上的培养特性基本相同,在电镜下呈现RV特有的形态结构,RNA电泳图具有典型的电泳带分布模式4、2、3、2规律,各项理化性质亦与文献报道一致。表明RV的细胞适应株的生物学性状有相当高的稳定性。

肾综合征出血热病毒50K结构蛋白的纯化和鉴定

徐志凯, 汪美先, 姜绍谆, 马文煜, 王海涛

1988, 3(2): 124

以HFRS病毒感染的乳小白鼠脑为原材料,用硫酸鱼精蛋白和PEG沉淀法制备粗病毒抗原。将此粗制抗原通过抗HFRS病毒MeAb与Separose4B偶联制成的免疫吸附柱,并用3MKCNS洗脱,获得了SDS-PAGE均一纯的特异性病毒结构蛋白,分子量为50,000道尔顿,具有较高的抗原滴度和良好的免疫原性。初步认为该蛋白可能是HFRS病毒的一种囊脱蛋白。

用PAGE-银染法分析乙型脑炎病毒的结构蛋白

张向明, 张国铭, 赵燕平, 俞永新

1988, 3(2): 131

本文采用SDS-PAGE银染法,分析了蔗糖梯度纯化的乙型脑炎病毒SA14株(JEV-SAl4)的结构蛋白。证明JEV-SAl4有三个结构蛋白:VP_1,VP_2和VP_3,分子量分别为9200;12,200和53,000。用非还原和还原双向电泳证明,它们都是以分子单体的形式存在于病毒颗粒上。

单纯疱疹病毒Ⅱ型转化人胚肺细胞在裸鼠体内成瘤实验

陈晨华, 曾莉, 董杰德, 宋元弟, 范博逊, 曹宗离, 仇素英, 于修平

1988, 3(2): 136

对三系转化的人胚肺细胞,分别在裸鼠体内进行了成瘤试验。其中两系转化细胞(29—33代)的成瘤率达100%,另一系(47代)为66%。转化细胞诱生的肿瘤生长迅速,局部瘤可循淋巴转移。瘤细胞可在裸鼠体内传代。瘤细胞形态学检查证实为低分化癌。该细胞带有HSV抗原。

狂犬病毒蚀斑方法的建立

严子林, 李正平, 王诠

1988, 3(2): 142

我们用CTN-1狂犬病毒二倍作细胞适应株[1]经蚀斑纯化而获得的CTN-2病毒株在BHK-21单层细胞培养建立了狂犬病毒的简易蚀斑技术。用连续10倍稀释的病毒悬液接种BHK-21细胞而产生的蚀斑数呈10倍规律的减少。该蚀斑技术用于蚀斑减少中和试验测定不同国际单位(IU)效价的抗狂犬病血清与原抗血清(IU)效价均高低成正比。用蚀斑中和试验测定了七批我国生产的人用精制抗狂犬病血清的IU效价与原抗血清IU效价的高低是相符的。

HSV诱导的dTK分析及其在抗病毒药物研究中的应用

汤华, 任中原

1988, 3(2): 148

本试验描述了以~(125)I—UdR为基质检测dTK活性的方法。发现HSV—1,HSV—2在感染的HeLa细胞中诱导产生了高活性的dTK,同时证明了病毒dTK对新的抗病毒化合物——DHPG存在较高的敏感性,并讨论了其敏感性与DHPG抗病毒作用的关系及其捡测dTK的可能意义。

某些环境促癌因素的实验研究——Ⅰ乌桕与了哥王对HSV_2诱癌的促进作用

孙瑜, 李新志, 王志洁, 张有新, 曾毅

1988, 3(2): 153

为了研究可疑促癌剂乌桕及了哥王提取物的作用,我们采用我室HSV_2诱发小白鼠宫颈癌的动物模型,进行体内促癌实验。这篇论文报道了实验结果。小白鼠分成6组,每组癌发率如下:HSV_2+0.9%;NaCl:13.0%;HSV_2+乌桕:40.0%;HSV_2+了哥王:36.4%;HSV_2+巴豆油:55.0%;乌桕+0.9%NaCl:7.7%;了哥王+0.9%NaCl:0。经过x~2检验指出差别在统计学上具显著性。因此我们提出:乌桕和了哥王提取物对小鼠宫颈癌有促进作用。与巴豆油提取物比较,其中巴豆油作用较强,乌桕作用次之,了哥王作用较弱。

某些植物病毒核糖核酸3′末端tRNA样结构

蒋秉坤, Alex van Belkum, Cornelis W.A.Pleij, Leendert Bosch

1988, 3(2): 157

按照Peattie(1979)直接化学定序法测定了某些植物病毒RAs(KYMV,CYVV,APLV和EMV)3’末端区域的核苷酸顺序。基于核苷酸顺序资料参照TYMV-RNA模型(Rietveld等,1982)提出它们3’末端的可能二级结构,即tRNA-样结构。KYMV、CYVV、OYMV、APLV和EMV-RNA3’末端的tRNA-样结构完全一致。此种对缬氨酸具有特异性的tRNA-样结构与真核生物缬氨酸tRNA也极为相似。缬氨酸反密码子(CAC)位于tRNA-样结构的适当部位。这些植物病毒RNA的核苷酸由于硷基配对在氨基酸接受臂内能产生12个硷基对的共轴堆砌。3’末端区域具有……(CC)A_(OH)末端。本实验结果支持Rietveld等1982年提出的TYMV-RNA3’末端二级结构模型。最后简要地讨论了tRNA-样结构的可能作用。

用微载体悬浮培养系统增殖细胞和病毒

肖成祖, 张呤庵, 孔惟惟, 王宏霞

1988, 3(2): 160

我们用我院制备的MC-1型微载体成功地培养了BHK-13,BHK-21,和CHO-KI三株细胞。当微载体浓度为5mg/ml,细胞接种量为30×10~4细胞/ml左右时,一般在三天都可达到1×10~6细胞/ml。此时接种10~(-1)或10~(-2)的VSV,在37℃培养20-24小时,病毒产量可达到6LogTCTD_(50)/ml以上,其中以CHO-KI细胞的产量最高,它们与静止培养的细胞产量基本一致,也不亚于鸡胚细胞增殖的产量。目前用该系统增殖的VSV已用于IFN的研究工作中。实验的结果也表明,用该系统增殖其它病毒和制备疫苗,以及大量培养已引入重组IFN基因的CHO工程细胞也将是可行的。

流行性出血热病毒(EHFV)在传代人淋巴细胞上的致病变作用增殖的研究

沈宏开, 姚盖新

1988, 3(2): 173

流行性出血热病毒陈株、L_99和SR_11株按种传代淋巴细胞克隆株Ly-A_6后第5~7日观察到CPE,开始时受感染细胞浆内颗粒增多,细胞圆缩、聚积成堆,随后细胞膜模糊不清,2~3天脱落,同时制片IFA检测到胞浆内特异性荧光颗粒,以上结果能被EHF免疫血清所中和。接种病毒后的细胞单层用l%甲基纤维素加维持液覆盖,第6日吸去覆盖液,加5%甲醛-1%结晶紫固定染色可见到明显的PFU。EHFV致病变细胞株的染得将为病原学研究提供了优越的基质细胞。

脾及淋巴结细胞对单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV—2)复制的抑制作用

满延高

1988, 3(2): 177

为寻找激活细胞免疫的制剂及定量分析免疫细胞对HSV-2复制的影响,作者先以不同干扰素处理及HSV-2感染C_(57)BL/6J小鼠,而后取其脾及淋巴结制成细胞悬液,加至HSV-2感染的Vero单层细胞中,37℃混合培养48小时后,大多数Vero细胞无异常形态改变,但在此单层中,可见一些大小不等,形态不一的无细胞区。在此区边缘,可见脾及淋巴结细胞包绕有病理形态改变的Vero细胞;来加脾及淋巴结细胞的感染性单层则显示细胞变大、变园、融合等病理性形态学变化,但仍维持完整的单层状态。将以上培养物冻溶后测病毒效价发现,不同来源、不同数量的脾及淋巴结细胞对HSV-2的复制均有一定抑制作用,但以经HSV-2感染及γ干扰素处理的小鼠之脾细胞作用最强。在此细胞与靶细胞比例为100:1时,病毒复制受抑制的Log_(10)数可达4以上。该抑制作用与非特异性可溶性细胞毒性物质、营养代谢,pH、干扰素等因素无关。以上结果提示:采取适当方法激活并吸引免疫细胞抵达病毒感染部位,溶解感染细胞或破坏其与正常细胞的联系,可能会更有效地对抗通过细胞途径扩散的病毒性感染。

芜菁花叶病毒粒体及寄主细胞内内含体的超薄切片电镜观察

韦石泉, 国际翔, 张哈愚

1988, 3(2): 191

从沈阳地区分离到侵染大白菜(Brassicapekinensis)及萝卜(Raphanussativus)的芜菁花叶病毒(TurnipMosaicVirus,TuMV)纯化繁殖于大白菜(小白口)及萝卜(长白品种)上。经约25天采收纯化繁殖的毒原材料,进行病毒粗提纯,并做病毒粒子的电镜观察。看到病毒粒体较为疏散清晰,丝状,长度多分布在720nm之间。另将接种TuMV的感病寄主有关部位,切成小块经固定、系列脱水、环氮树脂包埋后,制作超薄切片并用电镜观察,看到病叶、病茎和病根韧皮部细胞内,均有清晰的风轮状、环状及带状的内含体,这是马铃薯Y病毒组(Potyvirus)成员特征之一。

Novobiocin、Coumermycin A、Oxolinic acid、Nalidixic acid、溴化乙锭和ATP类似物对细菌病毒φ29细胞外DNA包装的抑制作用

郭培宣

1988, 3(2): 198

四种抗菌素Novobiocin、CoumermycinA、Oxolinicacid和Nalidixicacid以及化合物溴化乙锭(Ethidiumbromide)和ATP类似物γ—S—ATP能抑制噬菌体φ29DNA的细胞外包装。达到50%抑制作用的药物浓度(不包括ATP类似物)分别为每毫升5、90、167、380和1.3微克。当ATP类似物加入完全纯化的φ29胞外DNA包装系统时,DNA包装的中间产物积蓄,DNA包装流产,表明DNA装壳的整个过程均需ATP的参与。这一发现为抗病毒药物的研究提供另一条线索。本文并对φ29DNA包装的可能机制进行讨论。

壳粒在正二十面体病毒衣壳中的排列及其数学推算

王继科

1988, 3(2): 206

壳粒是病毒的一个形态亚单位,它有规律地排列在二十面体衣壳内。壳粒的数目(N)是由三角形剖分数(T)规定的:N=10T+2,T=pf~2,这里f是整数,p是级数,p=h~2+hk十k~2(h和k是没有公因数的任意一对整数)。如果已知h,k和f,就可以推算出壳粒数N。

应用反向间接血凝法早期诊断流行性出血热

陈竞芳, 李法卿, 唐家琪, 李先富, 谭维国

1988, 3(2): 212

1985年我们研制了流行性出血热(EHF)抗体致敏的诊断血球,建立了检测EHF抗原的R-PHA方法。用此法检测本所分离的EHF病毒株感染的VeroE_6细胞培养上清液,以及人工感染EHFV的小白鼠乳鼠脑悬液等,均获得良好结果。以后又应用此法检测了EHF早期病人血清、白细胞冻融液及人工感染EHFV的小白鼠乳鼠血清等,并作了特异的EHF抗体阻断试验,现将结果报告如下:

肾病综合征出血热病毒(HFRSV)的细胞内放射性标记

江紫生, 陈章林, 彭民, 易向民, 戴志芳, 刘红梅, 刘佩芹, 陈瑞琪, 万秋华

1988, 3(2): 216

Lee于1978年在南朝鲜分离到肾病综合征出血热病毒——Hantaan病毒后,我国病毒学者对HFRSV的分离、流行病学、血清学以及病毒形态学做了大量工作。近几年来国外用Hantaan病毒研究生化特征。研究病毒生化需要纯的病毒,针对HFRSV在细胞内复制周期较长,病毒产量低,我们用~3H—氨基酸对HFRSV进行细胞内标记,初步探索感染对细胞蛋白质合成的影响、标记的适当条件和标记HFRSV在病毒蛋白研究上的应用,现将结果报告如下:...

落叶松尺蠖核型多角体病病毒的病征及病毒的形态和组织病理观察

孙士英, 吕泽勋, 黄冠辉, 戴如一, 高延厅

1988, 3(2): 221

1983年7月,我们在围场县大面积的落叶松林地发现落叶松尺蠖(ErannisankerariaStaudinger)发生一种自然流行病,发病幼虫大量死亡。采集的病死幼虫经鉴定,确定其病原物为落叶松尺蠖核型多角体病毒(EaNPV),据现有资料,此病毒系国内外首次报道。现将该病毒的病征、病毒形态和组织病理观察结果总结如下。

禽网状内皮增生病病毒在鸡成纤维细胞培养上的长期无细胞病变感染

崔治中, L.F.Lee

1988, 3(2): 226

鸡胚及鸡胚成纤维细胞(CEF)培养已广泛地用于病毒学研究及许多种病毒疫苗的生产。鸡胚及CEF培养中的潜在病毒感染可干扰病毒学研究及疫苗质量。禽网状内皮增生病病毒(REV)是在免疫学上不同于禽白血病病毒的一群逆转录病毒,该群病毒的成员可分别在火鸡、鸡、鸭等禽类引起肿瘤、免疫缺陷综合症、生长迟缓等病理变化。在美国的一些流行病学调查表明,将近20%的鸡群有REV感染,虽然由其引起的经济损失还不清楚。在江苏省调查的三个鸡场中,也发现有一个存在REV感染。