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1995年10卷1期

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Review

植物病毒病化学防治的研究进展

江山, 韩熹莱

1995, 10(1): 1

病毒病害是农业生产中愈米愈突出的问题。由于病毒对寄主植物细胞的绝对寄生性和植 物没有动物部样完整的免疫代谢系统+使得植物一旦被病毒侵染就终生处在被病毒危害的状 态。这使得植物病毒病的防治较其它植物病害的防治更为围难,也给高选择性的化学抗植物 病毒剂的研究与开发带来了很大的困难。在相当长的一段时问里,抗植物病毒剂的研究一直 设肯大皿实甩价值。随着植物病毒学、病毒分子生物学和抗病毒齐4毒理学研究的深入,也使抗 植物病毒荆的发展步入了一个崭新的发展阶段。一些能防治植物病毒病的保栌剂、治疗荆利 对植物抗性肯醺导作用的药荆已开始实际应用。本文将从(1)目前植物病毒病防治的几种对 策;(2)如何提高防治效果;(3)抗植物病毒荆研究策略等三个方面对抗植物病毒荆的进展进 行一些评价和探讨。由于在植物病毒中RNA类的病毒占了绝大多数(93%), 且雹害严重的 植物病毒也都是RNA类病毒,因此本文集中讨论RNA型植物病毒的化学防治。

甜菜坏死黄脉病毒分子生物学研究进展

姚华建, 于嘉林, 刘 仪

1995, 10(1): 8

甜菜坏死黄脉病毒(Be~tNecroticYellowVeinVirus,BNYW )是一种由甜菜多粘菌(polf,,~ta )传播的病毒1987年,囤际病毒分类委员会将萁划分为真菌传杆状病毒组(Furovirus)的 可能成员 。由于甜菜坏死黄脉病毒引起甜菜丛根病,造成甜菜产量和含糖量的严重下降,给 制糖业的发展带来了很大的威胁.所以引起了世界各国的广泛重视。近年来,在甜菜坏死黄脉 病毒分子生物学研究方面取得了很大的进展,本文将对此作一综述。

狂犬病毒蛋白和N蛋白在痘苗病毒天坛株中共同表达

赵卫国, 朱家鸿, 王继麟, 蔡兵

1995, 10(1): 15

本文构建了一个能同时表达狂犬病毒糖蛋白(G)和核蛋白(N)两种蛋白的重组痘苗病毒。用Southembiot和免疫荧光等方法证明G和N基因已重组到痘苗病毒TK基因区,而且能良好地表达。并证明该重组病毒在小鼠中具有良好的免疫效果。

PCR制备的地高辛素标记的探针检测轮状病毒核酸

卓礼梅, 徐帆, 陈火胜, 严泳楷

1995, 10(1): 22

用聚合酶链反应(PCR)技术,制备了轮状病毒第9基因部分片段的地高辛标记的cDNA探针。DNA-RNA斑点杂交表明该探针具有轮状病毒A组的特异性,可检出10pgHRV-RNA。实验中选择了粪便标本提取核酸后点膜和粪便上清直接点膜进行斑点杂交,两种方法的结果一致;同时将斑点杂交法与PAGE法的结果进行了比较。实验结果表明用PCR技术直接制备地高辛索标记的cDNA探针具有方便、快速、标记率高、特异性强的特点,具有一定的应用前景。

鼻咽癌中Epstein—Barr病毒基因结构特点

姜志龙, 卢健, 陈诗书

1995, 10(1): 25

鼻咽癌中感染的EBV以潜伏态存在,只有少数基因得到表达。我们从分子生物学水平研究其潜伏机制。已知BZLFl基因和BamHIEZ片段内部分基因对EBV的复制激活起关键作用。我们用体外基因扩增(PCR)法扩增BZLFl基因外显子-1序列,并用序列分析法研究了该基因结构特点。此外,检测了BamHIEZ片段内缺失,结果发现21例鼻咽癌(NPC)组织中,ll例有BamHIEZ片段内缺失,长2.99kb,与潜伏态存在的RajiEBV类似。提示鼻咽癌小的EBV以潜伏态存在,与NPC发病有关。

反义寡聚脱氧核苷险(ODN)衍生物抑制乙肝病毒抗原表达的研究

袁正宏, 何丽芳, 赵苏伶, 吴祥甫, 陈常庆

1995, 10(1): 34

为比较针对中不同基因的ODN硫代衍生物阻断乙型肝炎病毒(HBV)的抗原表达,合成了与核心蛋白编码基因起始码上游序列(#1893-1907),多聚酶蛋白编码基因起始码上游及内部序列(#2297-2313,#2797-2813)3.5kbRNA3′端起始负链DNA合成序列(#l817-1831)互补的寡聚脱氧核苷酸硫代衍生物[C-ODN,P-ODN,PM-ODN,PBS-ODN],分别在HBV短暂表达和稳定表达细胞培养系统中观察其抑制HBV抗原表达的作用。结果发现,当培养液中ODN浓度为20μmol/L时,四种ODN均能抑制HepG22.2.15细胞HBsAg(乙肝表面抗原)的产生(抑制率分别为:C-ODN,24.5%;PODN,13.4%;PM-ODN,38.4%;PBS-ODN,28.4%);与HBVDNA双体质粒共转染HepG2细胞后部分ODN可明显抑制HBVDNA在细胞内表达(HBeag分泌抑制率分别为:C-ODN,52%;PM-ODN,70%;P-ODN,48%;PBS-ODN,18%)。用测定上清中人白蛋白的结果证明,C-ODN的细胞毒作用最低。对C-ODN的作用机理及进一步发展ODN的应用也进行了讨论。

呼吸道合胞病毒自然温度敏感株的研究 I.呼吸道合胞病毒自然温度敏感株的筛选及其特性的 初步研究

周生华, 董继华, 田慕贞

1995, 10(1): 41

本文利用离心蚀斑法从武汉地区1978-1983年及1987-1992年的73株呼吸道合胞病毒流行毒株中直接筛选出17株自然温度敏感株,并以33°/39.5°C的IgPFU相差≥3作为确定自然温度敏感株的标准。每年筛选出自然温度敏感株的比例平均为15-l7%;根据毒株温敏性状的差异,将呼吸道合胞病毒流行株分为ts ̄+,ts ̄±与ts毒株;并初步发现B亚型毒株所含的自然温敏株的比例明显高于A型毒株(P<0,05)。初步测定2株该自然温敏株的遗传稳定性,结果显示具有较稳定的特性。本文结果提示,呼吸道合胞病毒在自然界不仅存在A,B两亚型变异,也存在温敏性状的变异,可能存在毒力的变异。

原位分子杂交研究肾综合征出血热尸检组织中汉垣病毒M和sRNA的分布

杨守京, 刘彦仿, 张劲凤, 尚高峰, 晏培松, 胡明华

1995, 10(1): 48

本文以核酸原位分子杂交法研究了国内不同地区HFRS尸检病例组织中病毒RNA的分布和定位。结果在19例病例组织中均可检测到病毒RNA。陕西及沈阳地区病例,阳性部位主要是各脏器上皮及实质细胞。江西地区病例,病毒RNA主要出现于各脏器组织内血管壁及毛细血管内皮细胞。广州一例,病毒RNA主要分布于肝脏灶性溶解性坏死区域,肺泡壁和肾间质血管等部位。病毒RNA主要定位于细胞胞浆,呈颗粒状或全浆阳性,也出现干部分组织少数细胞胞核中。此外,病毒RNA还出现于细胞外液和红细胞表面。结果说明,HFRS病毒具有泛嗜性感染及上皮性组织或血管内皮细胞易感的特点,后者可能取决于不同地区HFRS病例所感染的病毒的血清型或毒株不同,从而引起不同类型HFRS及其病理和发病机理的差异。

棉铃虫核型多角体病毒在生态环境中的滞留及作用

张忠信, 张光裕, 彭辉银, 陈新文

1995, 10(1): 56

棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)杀虫剂可湿性粉剂防治第三代棉铃虫,防治效果为86.2%。使用酶联免疫法(ELISA)检测棉铃虫核型多角体病毒在土壤中的滞留,结果表明:施用病毒杀虫剂1、3、5、7天和两个月后都可检测到该病毒的存在。1993年9月上旬从河南封丘棉田采集的露水,pH为7.98,病毒多角体在露水中保存3天,其生物活性无明显下降。

油桐尺蠖核型多角体病毒感染Bs484细胞的研究

徐旭士, 张超英, 谢天恩

1995, 10(1): 61

本文报道利用油桐尺蠖核型多角体病毒感染处于不同培养基及不同培养时间的Bs484细胞的部分感染效果和特征。结果表明,细胞培养基的类型和细胞传代后的时间对病毒感染率和多角体产量以及其它感染特征都有比较明显的影响;经过比较,处于Grace培养基组的传代后三天的Bs484细胞是一个理想的BsNPV感染受试系统。同时发现,健康的油桐尺蠖血淋巴具有提高细胞活性及病毒感染效果的作用。

木毒蛾质型多角体病毒形态结构及理化特性的研究

田华松, 张立人, 陈棣华, 陈尧顺

1995, 10(1): 67

木毒蛾质型多角体病毒呈不规则多面体,大小差异较大,大多数在0.8~2.1μm之间;病毒粒子在多角体内随机分布,病毒粒子为正二十面体结构,有12个顶体,每个顶体上均有一个球状结构,平均直径约为60nm。经SDS-PAGE分析,多角体蛋白由一条分子量为3lkD的主带及3条次带组成;病毒粒子结构蛋白由6条多肽组成,分子量在12.6~33kD之间。多用体蛋白富含天冬氨酸,谷氨酸及酪氨酸,而半胱氨酸和甲巯氨酸含量较少,其碱性氨基酸与酸性氨基酸之比为1.43。病毒核酸对RNasc和DNase的稳定性试验及对甲醛的稳定性试验和吖啶橙染色试验,证明孩核酸为双链RNA,其解链温度为87℃,由10个基因片段组成,分子量在2.46×106~0.35×106道尔顿之间,总分子量为14.42×106道尔顿,电镜分析研究显示该核酸长度在0.5μm、1.0μm和1.3μm处各有一个分布峰。

用32P标记eDNA探针进行核酸斑点杂交检测马铃薯卷叶病毒(PLRV)

扈惠平, 哈斯阿古拉, 张鹤龄

1995, 10(1): 75

利用克隆的马铃薯卷叶病毒(PLRV)外壳蛋白(CP)基因测cDNA,用切口平移法制成 ̄(32)P标记探针,通过核酸斑点杂交,对马铃薯卷叶病毒RNA,提纯的马铃薯卷叶病毒和感染PLRV的马铃薯茎、叶、块茎及带毒桃蚜进行了检测。结果表明:PLRV-CP基因的cDNA探针特异性强,灵敏度高。可测出提纯的PLRV-RNA的最低量为40pg,感病马铃薯植株茎叶提取液的最高稀度为1:75。探针只与PLRV及其RNA反应,而不与PVY、PVS等病毒及其RNA反应。从而为马铃薯卷叶病毒的有效诊断,建立了一项比血清学更为可靠、灵敏、特异性强,同时又适于大量样品检测的分子生物学方法。

侵染蚕豆的烟草花叶病毒研究

周雪平, 张龙, 陈集双, 李德葆

1995, 10(1): 81

1993年4月从杭州蚕豆田病株上分离获得病毒分离物B-935A,汁液摩擦接种5科19种植物,B-935A能侵染3科12种植物。被侵染的蚕豆产生黄斑、花叶,后期叶片黄化并有坏死;在菜豆上产生局部枯斑。B-935A的钝化温度为85-90℃,稀释限点为10 ̄(-5)-10 ̄(-7)病毒粒体杆状,平均长度约300nm,病毒的衣壳蛋白亚基只有一条多肽链,分子量约为17.5kD,包裹的核酸为申链RNA,长约6.4kb.琼脂双扩散试验和免疫电镜试验表明,B-925A与烟草花叶病毒(TMV)有十分密切的血清学关系。根据以上试验结果,B-935A被鉴定为烟草花叶病毒的蚕豆株系。这是国内外首次报道从蚕豆上分离到TMV,也是我国首次从豆科作物上分离到的一个TMV株系。

牛病毒性腹泻病毒的成熟和释放

张荣兴, 王新华, 葛锡锐

1995, 10(1): 86

试验中用电镜观察了牛病毒性腹泻病毒OregonC24V株在感染新生牛睾丸细胞中的形态发生,成熟的病毒颗粒是直径约为50nm的球形颗粒,内含直径约为30nm的核心。病毒在宿主细胞的胞质内复制,通过糙面内质网膜出芽成熟。病毒可以通过外排或在细胞死亡后含有病毒颗粒的空泡崩溃而释放到胞外。

不同世代及中肠病变类型的松毛虫单头幼虫多角体含量

许再福, 戴冠群

1995, 10(1): 92

不同世代及中肠病变类型的松毛虫单头幼虫多角体含量许再福(浙江农业大学植保系,杭州310029)戴冠群(华南农业大学植保系,广州510642)关键词马尾松毛虫,质型多角体病毒,多角体含量,世代,病变中肠源于日本赤松毛虫质型多角体病毒(Dendrolim...

小盾纤恙螨自然感染流行性出血热病毒的研究

张云, 胡云龙, 赵学忠, 吴光华, 姜克俭

1995, 10(1): 94

小盾纤恙螨被认为是流行性出血热(EHF)的传播媒介。为查明其媒介意义。】989年和1990年.我们曾先后甩。鼠体恙螨分离法(I法) 和“自然界游离螨叮刺黑线姬鼠法(I法)”D 进行本课题的研究,取得了初步的结果。]991年.又用两种新方法(Ⅲ法和N法)进行研究,取得了进一步的结果,作出了明确的结论。