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1996年11卷1期

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Review

马铃薯卷叶病毒(PLRV)基因组研究进展

张鹤龄

1996, 11(1): 1

马铃薯卷叶病毒(PLRV)基因组研究进展张鹤龄(内蒙古大学生物系,呼和浩特010021)关键词马铃薯卷叶病毒,基因组TheAdvancesinPLRVGenomeResearchZhangHeling(InnerMongoliaUniversity,...

HIV-1感染初始阶段的分子机制

项秉懿

1996, 11(1): 9

HIV-1感染初始阶段的分子机制项秉懿(第四军医大学分子生物学研究所,西安710032)关键词艾滋病,人类免疫缺陷病毒-I型,包膜糖蛋白gp120,CD4受体,感染TheMolecularMechanismofHIV-1InfectionintheI...

戊肝与丙肝病毒在献血员人群中感染状况的对比研究

李方和, 杨东亮, 赵西平, 喻植群, 汪由坤, 郝连杰

1996, 11(1): 17

采用市售试剂对武汉地区乡村献血员进行血清抗HEV与抗HCV检测,两者的阳性率分别为5.74%及9.35%。在288份有ALT记录的单采浆献血员中,有近期ALT升高史的献浆者抗HEV及抗HCV检出率分别为14.04%及14.18%,均显著高于无近期ALT升高史的献浆者。对上述标本同时进行多项血清HBV标志检测,抗HEV阳性及抗HCV阳性组献血员多项HBV标志检测结果与相应阴性组比较均未见显著的差别。

用原位分子杂交和免疫组化研究肾综合征出血热肾组织中的病毒感染

杨守京, 刘彦仿, 胡锡祺, 李明升, 胡明华

1996, 11(1): 21

应用原位分子杂交和免疫组化技术研究了陕西、沈阳、上海、江西、广州等地收集的36例肾综合征出血热(HFRS)尸检肾组织中的病毒RNA和抗原的定位和分布。病毒RNA检测34例,28例阳性;抗原检测34例,30例阳性,病毒RNA及其抗原主要定位于细胞胞浆中。西安及沈阳地区的病例,病毒RNA和抗原阳性部位主要是肾小管上皮细胞,较少出现血管阳性。上海、江西和广州地区病例病毒RNA主要出现于肾间质血管和少数病例的个别肾小球毛细血管和肾小管上皮细胞;病毒抗原分布于肾间质血管和肾小管上皮中。1例(广州病例)肾血管平滑肌细胞检测到空泡状病毒NP抗原。另外在3例西安病例和9例上海病例肾远曲小管和集合管上皮中检测到NP和HA阳性的病毒包涵体。结果说明HFRS病毒可感染肾脏中肾小管上皮和血管内皮,并在肾小管上皮细胞产生包涵体。不同地区病例肾脏中病毒感染的部位不同,可能与不同地区病例所感染的病毒毒株或血清型不同有关。肾小管上皮细胞和血管内皮的损伤除病毒直接作用外,还可能有免疫因素参与。

人原发性肝内胆管细胞癌中HCVRNA及其NS 3区抗原的分布及意义

王春杰, 王文亮, 王伯云

1996, 11(1): 29

应用原位分子杂交及免疫组化方法,使用地高辛标记HCV5′非编码区探针及抗HCVNS3区C33c单克隆抗体,对35例人原发性肝内胆管细胞癌(PIC)和癌旁肝组织内HCVRNA及其NS抗原进行检测,结果发现HCVRNA在PIC中的阳性率为83%,HCVRNA定位于癌细胞胞浆中。个别病例并在淋巴细胞、肝窦内皮细胞和枯否氏细胞中发现阳性信号。HCVNS3区C33c抗原在PIC的阳性率为89%,阳性反应主要位于癌细胞胞浆内或肝细胞胞浆内。阳性细胞在癌组织中以灶性分布为主,在癌旁肝以弥漫分布为主。HBxAg在本组病例的阳性率为77%。结果提示:在肝内胆管细胞癌的发生中,除HBV以外.HCV感染与其发生也有密切关系,是其致病因素之一。

一株新的狂犬病重组痘苗病毒某些生物学性质的研究

吴雷, 朱家鸿

1996, 11(1): 34

对表达狂犬病毒糖蛋白的重组痘苗病毒VVM11KRG株生物学性质进行了研究,该重组病毒的特点是:(1)糖蛋白基因插入到痘苗病毒天坛株基因组HindⅢM片段中;(2)启动子为痘苗病毒天坛株P11晚期启动子;(3)不含外源lac基因。该重组病毒在CV-1细胞和鸡胚细胞上繁殖滴渡略高于另一株重组痘苗病毒VVTK11KRG,在鸡胚细胞中繁殖滴度第三天达到最高,在CV-1细胞中第二天达到最高。温度稳定性与天坛株相比没有明显改变。重组病毒在家兔皮内的毒力比亲本株(天坛株)低。间接免疫荧光和Westernblot都证明了狂犬病毒糖蛋白有良好的表达。通过Southernblot证实糖蛋白基因准确地插入到HindⅢM片段中。重组痘苗病毒启动子与部分糖蛋白基因克隆到pGEM3zf(-)质粒上,对该段DNA序列分析表明不会产生移码和融合蛋白,从而为该重组病毒的使用提供了明确的基因背景资料。

药物对病毒感染培养心肌细胞Ca~(2+)内流及CVB_3-RNA复制的影响

郭棋, 彭天庆, 杨英珍, 顾全保, 赵剑星

1996, 11(1): 40

应用放射性同位素 ̄(45)Ca ̄(2+)示踪技术及光敏生物素标记cDNA探针杂交方法,观察了维拉帕米、黄芪、地塞米松等药物对感染柯萨奇B_3病毒(CVB_3)的大鼠培养心肌细胞Ca ̄(2+)内流及细胞中CVB_3-RNA复制的作用。结果发现:在病毒感染48h,上述三药均可显著减少感染细胞及正常对照的心肌Ca ̄(2+)内流(P<0.01和P<0.05);若在病毒感染后即加入上述药物,经48h培养后,黄芪组细胞中的CVB_3-RNA含量显著少于病毒对照组(P<0.001),维拉帕米则显著增加(P<0.01).而地塞米松对其无影响。提示黄芪与地塞米松具有一种与维拉帕米相似的减少病毒感染心肌Ca ̄(2+)内流的作用,有可能减轻感染细胞的继发性Ca ̄(2+)损伤;但三种药物对感染细胞中病毒核酸的复制有不同作用,可作为临床治疗病毒性心肌炎时的参考。

感染流行性出血热病毒的正常人骨髓细胞膜脂和酶生物活性的研究

曾令兰, 罗端德, 蔡淑清, 刘薇, 杨渝珍, 郭劲松

1996, 11(1): 45

采用疏水性荧光探针DPH(1,6,-苯基-1,3;5-已三烯)标记感染了流行性出血热病毒的正常人骨髓细胞的细胞膜,根据荧光偏振值的变化推导出膜脂流动性,同时通过细胞组化染色定量方法,测定细胞内酸性磷酸酶(ACP)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。动态观察1、6、24、72h培养后的淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞,发现感染后细胞膜脂的流动性明显降低,并随培养时间的延长而明显,和正常对照组比较有显著性差异(P<0.05~0.01)。通过组化染色和显微分光光度计单细胞扫描定量认为:感染细胞在培养开始的72h内ACP、SDH升高,120h后明显下降,和正常相比亦有显著差异(P<0.05),这与病毒侵犯和细胞机能的受损程度有关。

油桐尺蠖核型多角体病毒感染Bs484细胞的增殖与病理研究

徐旭士, 刘润忠, 罗玉萍, 李思光, 赵贵军

1996, 11(1): 49

用油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)感染Bs484细胞,对感染后病毒增殖的部分性质及细胞病理变化进行了研究。结果表明:1.病毒子代的增殖在感染后的不同时间具有不同的变化形式,且增殖量与感染剂量具有一定程度的相关,2.病毒感染细胞后12小时开始在培养物上清检测到明显的胞外病毒粒子;3.就BsNPV的增殖而言,24~26℃是其最佳发育温度;4.病毒感染细胞后的明显病变特征是核内充满多用体,细胞堆积以及细胞体积膨大,同时观察到二类感染细胞,一种核内含较多的多角体,另一种核内则只有几个多用体。

不同抗性的榨菜在芜菁花叶病毒感染后细胞超微结构的研究

徐均焕, 李德葆, 盛方镜, 方月鲜

1996, 11(1): 61

超薄切片观察表明,在三种感染芜菁花叶病毒的榨菜叶肉细胞内均发现有各种形状的内含体和病毒粒子的存在。内含体形状有风轮状、束状、管状、环状和板状聚集体,且不同抗性的榨菜品种细胞内所含的内含体数量、种类及所占的比例亦不同,抗性较弱的90-149榨菜品种叶肉细胞内内含体数量较多,以管状及环状内含体所占比例为多,束状及风轮状内含体所占比例较少;抗性较强的90-139榨菜品种叶肉细胞内内含体数量较少,且以束状及风轮状内含体所占比例较多,环状及管状内含体所占比例较少。而抗性中等的90-146榨菜品种叶肉细胞内内含体数量及所占比例介于上述两者之间。病毒粒子也以易感病的90-149榨菜叶肉细胞内含量最多,均以束状或拟晶格状存在。此外感病初期细胞内线粒体及粗面内质网数量有不同程度的增多,且以易感病的品种叶肉细胞内这些细胞器增加明显,但健康植株内以抗性较强的品种含这些细胞器较多。随着病毒症状的发展,叶绿体畸形,肿大,基质消失,外膜破裂直至解体。

一些抗植物病毒剂对烟草花叶病毒衣壳蛋白体外聚合过程的影响

江山, 郭雪柳, 韩熹莱

1996, 11(1): 69

一些抗植物病毒剂对烟草花叶病毒衣壳蛋白体外聚合过程的影响江山,郭雪柳,韩熹莱(北京农业大学基础科技学院,北京100094)关键词抗植物病毒剂,烟草花叶病毒,病毒衣壳蛋白,体外聚合研究表明,有些植物病毒的核酸对寄主植物的侵染活性只有装配完整的病毒颗粒的...

核酸酶保护试验在黄瓜花叶病毒株系鉴定中的初步应用

谢响明, 于嘉林, 刘仪

1996, 11(1): 69

采用黄瓜花叶病毒(CMV)亚组Ⅰ株系Fny-CMVRNA_2的1209~1626核苷酸片段和亚组Ⅱ株系Ls-CMVRNA_2的2002~2433核苷酸片段的cDNA克隆,体外转录,同时掺入 ̄(32)P获得负链RNA探针,与纯化的番茄和甜椒上的CMV中国分离物的RNA杂交,结果表明:CMV番茄和甜椒中国分离物与Fny-CMV的核苷酸有高度同源性,隶属于Fny-CMV为代表的亚组Ⅰ株系。并利用K-CMV株系(亚组Ⅰ,源于中国)的RNA_2全长cDNA克隆的两个EcoRI位点间的核苷酸序列(1657~2125nt)作探针,与上述两种CMV中国分离物的RNA杂交,进一步比较分析了这两个分离物和K-CMV株系的关系。讨论了核酸酶保护法在CMV株系鉴定中的作用。

采用柱层析法提纯狂犬病毒的研究

顾鸣, 邵益斌, 顾勤, 曾蓉芳

1996, 11(1): 81

采用柱层析法提纯狂犬病毒的研究顾鸣,邵益斌,顾勤,曾蓉芳(卫生部上海生物制品研究所,上海200051)关键词狂犬病毒,柱层析法迄今,分离提纯包膜病毒的方法多采用密度梯度离心法、亲和层析法和等电聚焦法等,这些方法有一定的优点,但用在处理量很大的病毒疫苗...

检测大麦抗BYDV的蚜虫获毒的酶联免疫吸附法

刘常宏

1996, 11(1): 84

检测大麦抗BYDV的蚜虫获毒的酶联免疫吸附法刘常宏(陕西省植物保护研究所,陕西杨陵712100)S.Haber(AgricultureCanada,WinnipegResearchStation,Canada)关键词酶联免疫吸附法,大麦,大麦黄矮病毒...