For best viewing of the website please use Mozilla Firefox or Google Chrome.

1996年11卷2期

|     

Review

真核藻类的病毒和病毒类粒子(VLPs)

赵以军, 石正丽

1996, 11(2): 93

真核藻类的病毒和病毒类粒子(VLPs)赵以军石正丽(中国科学院水生生物研究所,武汉430072)(中国科学院武汉病毒研究所,武汉430071)VirusesandVirus-likePearticlesofEukaryoticAlgaeZhaoYij...

番木瓜环斑病毒株系、分子生物学及其防治研究进展

肖火根, 范怀忠

1996, 11(2): 103

番木瓜环斑病毒株系、分子生物学及其防治研究进展肖火根,范怀忠(华南农业大学植物病毒研究室,广州510642)AdvancesofResearchontheStrains,MolecularBiologyandControlofPapayaRingsp...

杯状病毒的分类和分子生物学研究进展

毛春生, 金宁一, 殷震

1996, 11(2): 110

典型的杯状病毒呈球形或近球形,直径30-35 nm,无囊膜,核衣壳呈二十面体对称.由32 个壳粒组成,核衣壳上整齐地排列着暗色中空的杯状结构,这种杯状结构在正二十面体的20 个面及12个顶点各有一个。但兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus.R}mlV)、诺沃克病毒(Norwalk virus,Nv)、戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus.HEV)的衣壳上的这种杯状结构在电镜下并不十分清楚 2· 。杯状病毒的分子量大约为15×10 ,s20 =170~187,氯化铯中的浮密度为1.33~1.4O g/c ,酒石酸钾.甘油中的浮密度为1.29 g/cm ,对乙醚、氯仿和温和性去污剂敏感,DH3~5可将其灭活,高浓度的Mg 能够加快热对杯状病毒的灭活作用 J。杯 状病毒主要引起人和动物的胃肠炎,导致腹污;在动物还可能引起皮肤、粘膜损伤,甚至败血 症。多数病毒不能在体外培养,但圣米吉尔海狮病毒(San Miguel sea 1ion virus,SMSV)、猪水疱疹病毒(Vesicular exanthema virus,VESV)、猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)可在体外继代,病毒在胞浆中台成和成熟,有时呈晶格状排列ll, , 。

炭凝集试验快速检测呼吸道合胞病毒的研究

董继华, 江汉珍, 周生华, 谢红斌, 田慕贞

1996, 11(2): 116

用炭凝集试验(CAT)检测呼吸道合胞病毒(RSV),结果表明该法是一种简便、快速、特异的诊断方法。用CAT对16株RSV和8株其它病毒做试验,结果仅RSV凝集,而其它病毒均阴性。用该法与细胞培养法检测83份临床呼吸道感染幼儿鼻咽吸出物,结果CAT法阳性率为69.88%(53/83),细胞培养法为39.75%(33/83),两者阳性检出率相差极显著。阻断试验证明CAT是高度特异的。结果证明CAT具有较高的敏感性与特异性,可用于临床RSV标本的快速检测。

以人工合成多肽为抗原的戊型肝炎病毒抗体检测方法的建立和评价

洪世雯, 何红霞

1996, 11(2): 120

酶联法是HEV感染的主要检测方法,多采用基因表达产物为抗原。近来由于人工合成多肽抗原克服了基因重组抗原制备复杂、非特异结构多、难以纯化的缺点,已广泛用于多种病毒感染的检测。根据已发表的HEV氨基酸序列的保守性及亲水性等特点,设计合成了两个多肽ESP1和ESP2,分别位于ORF2和ORF3区,以此为混合抗原建立了检测HEV抗体的间接ELLSA法,与市售优质试剂比较,其阳性符合率为97.75%,阴性符合率为99.43%,总符合率为98.86%。该方法灵敏度高、特异性强、安全快速,是检测HEV感染和流行病学调查的理想方法。

从病人外周血单个核细胞中检测HHV-6:分离培养和基因扩增

陈斌, 姚堃, 周瑶玺, 季晓辉

1996, 11(2): 125

收集婴幼儿急疹及淋巴系统增生性疾病患者外周血单个核细胞进行体外培养,从7例婴幼儿急疹及2例淋巴系统增生性疾病患者中分离出一种病毒,此病毒能在PHA激活的人脐血单个核细胞中传代生长,产生典型CPE:形成气球样巨细胞。电镜下观察,感染细胞中可见直径180nm左右,有包膜,疱疹样病毒颗粒;血清学试验证明分离株与HSV-1,2、HCMV、及EBV无抗原交叉,而与HHV-6GS株间存在抗原一致性;多聚酶链反应表明该分离株HHV-6特异性DNA阳性;综合以上结果,初步认为该分离株为HHV-6。同时还用pCR法对所收集的标本直接检测HHV-6特异性DNA。PCR法与病毒分离法相比较,前者HHV-6检出率为88.8%(16/18).后者为38.9%(7/18)。

EB病毒转化Hu-TLC-SCID小鼠脾细胞的实验研究

左丽, 郭辉玉, 张昌卿

1996, 11(2): 132

利用EB病毒转化可产生较高水平人IgG和特异性抗2型登革病毒人抗体的Hu-TLC-SCID小鼠脾细胞,通过免疫组化、免疫荧光和PCR法检测转化细胞的人B细胞表面标志、EB病毒抗原和EB病毒基因。结果表明,被转化的Hu-TLC-SCID小鼠脾细胞能继续产生抗2型登革病毒的特异性人抗体,并具有人B细胞的、SmIgG标志及EB病毒潜伏膜蛋白-1(LMP-1)基因,可表达LMP-1和EB病毒核抗原(EBNA)。

山楂粉蝶NPV的形态发生及其宿主细胞器的超微病理变化

柴一新, 张立人, 李淑琴, 张力军

1996, 11(2): 138

应用电子显微技术,对山楂粉蝶核型多角体病毒感染三龄幼虫后,该病毒在体内的形态发生过程及其宿主细胞病理超微结构的变化等进行了观察与分析。结果表明:病毒感染72~168h后,山楂粉蝶幼虫中肠上皮细胞内出现病毒发生基质、核衣壳、套膜、丝状纤维或称前多角体蛋白。病毒粒子、病毒束,以及病毒束嵌入多角体蛋白,装配成完全的病毒多角体。在相应的中肠上皮细胞内,细胞器如线粒体、粗面内质网、核糖体、溶酶体等均发生显著的病理变化。同时还应指出的是内质网呈指纹图谱型,板层体与示髓样小体等膜状结构的病理变化比较特殊。

马铃薯卷叶病毒基因间隔区的克隆及序列分析

董江丽, 哈斯阿古拉, 张鹤龄

1996, 11(2): 144

根据已报道的马铃薯卷叶病毒基因组序列.设计合成一对特异性引物,以马铃薯卷叶病毒中国分离株(PLRV-Ch)的RNA为模板,反转录合成cDNA第一条链,经PCR扩增后克隆于pUC19质粒中,进一步用PCR鉴定、限制酶切分析和序列分析,结果表明:PLRV-Ch基因间隔区由197个核苷酸组成,与国外报道的荷兰PLRV-N加拿大PLRV-C,澳大利亚PLRV-A,苏格兰PLRV-S各株系核苷酸序列具有很高的同源性,同源率依次为99%、98%、93%、98%。

侵染香蕉的黄瓜花叶病毒株系的形态和生物学特征

李华平, 范怀忠

1996, 11(2): 149

对香蕉花叶病广东三个代表分离物的形态和生物学特征进行了较为全面的研究。在六种鉴别寄主上,斑驳类(MM)和断续条纹类(BS)分离物侵染较多的寄主种类诱导较为严重的症状,连续条纹类(CS)分离物侵染能力较弱。电镜观察表明:BS、CS和MM三个代表分离物的粒子呈球状、其粒子直径分别为22.5、24.3和27nm,纯化的病毒粒子电泳相对迁移率分别为0.72、0.56和0.51,在西葫芦上的增殖速度:不管在子叶或真叶,都是MM最快、BS次之、CS最慢。从西葫芦接种叶运转出接种叶的速度:MM和BS相似、CS明显较慢。在烟草上,三个分离物的运转速度和增殖速度以MM最快、BS次之、CS最慢;而且在烟草上随着接种后时间的延长,三个分离物除MM维持高浓度的时间较长外,BS和CS的都很短。在西葫芦和烟草上提纯产量,MM类最多、BS类次之、CS类最低。

抗水稻条纹叶枯病毒核酶的设计、克隆及体外活性测定

刘力, 陈声祥, 邱并生, 康良仪, 田波

1996, 11(2): 157

为探索控制水稻条纹叶枯病毒(Ricestripevirus,RSV)设计合成了特异切割该病毒RNA保守区及编码病害特异性蛋白(DiseaseSpecificProtein,DSP)基因的核酶,核酶基因的长度均为40个碱基,用化学合成方法合成其正链及与其3'-末端互补的15个碱基引物,用TagDNA多聚酶合成其互补链。双链DNA直接插入克隆载体PGEM3zf(+)的Smal位点。序列测定表明,克隆得到的核酶序列与设计的核酶序列完全一致。经SP6RNA多聚酶体外转录得到核酶RNA。当核酶RNA与以同样方法转录得到的靶基因RNA混合反应,可得到预期结果相同的切割片段,表明两种核酶在体外均具有特异性切割活性。

抗水稻矮缩病毒的反义核酶及复制酶部分序列的合成、克隆及其水稻表达载体的构建

王苏燕, 盛刚, 刘伟平, 叶寅, 田波

1996, 11(2): 164

采用反转录-聚合酶链式反应方法(RTP-CR),在人工合成的引物引导下,扩增出水稻矮缩病毒基因组第一片段(S1)全长序列及第五片段的部分序列(SSⅢ).将扩增的片段分别克隆到克隆载体pGEM7Zf(+)及pUC19的smal位点上,并进行了序列测定。在此基础上,利用pCR引入的方法将核酶序列引入到S5Ⅲ片段反义链上以构成反义核酶基因S5ⅢR,将S1片段5'端部分序列(S1-1)及S5ⅢR基因克隆到植物表达载体pROKⅡ上,构建成水稻转化载体pROK-S1-1'及pROK-S5ⅢR。

应用单链构象多态性-聚合酶链反应研究我国大麦黄花叶病毒株系的分化

施农农, 陈剑平

1996, 11(2): 170

根据致病性差异,我国大麦黄花叶病毒(BaYMV)存在若干不同株系,血清学和核酸杂交等技术不能区分这些株系。但还由于致病性不同,各株系的核酸序列间必定存在差异。最近建立的单链构象多态性。聚合酶链反应(SSCP-PCR)技术能灵敏而有效地诊断和区分核酸序列间的差异,从而进一步证实我国BaYMV不同株系的分化。

用PCR扩增和克隆马立克氏病病毒糖蛋白D基因

段玉友, 崔治中, 殷震

1996, 11(2): 176

用PCR技术,从GA株马立克氏病病毒(MDV)感染的成纤维细胞(GEF)基因组DNA中扩增出MDV糖蛋白D(gD)抗原基因片段的约1300bp编码序列,将该pcR扩增的产物于EcoRI和Kpnl位点克隆到pUC18质粒载体中,在以digoxigenin(dig)标记的gDPCR产物作为探针,进行原位杂交初步筛选到阳性重组质粒克隆,再根据酶切分析筛选到含MDVgD基因的重组质粒p18MgD。将p18MgD质粒DNA用dig标记后,在Southernblot中,该探针能识别MDV基因组DNA的BamHI-A克隆中的A片段DNA。酶切位点分析表明,该gD克隆也和已发表的MDV的RBIB株gD一样,不含有EcoRⅠ、HindⅢ、PstⅠ、SmaⅠ、pvuⅡ等酶切位点。证明该重组质粒是MDVgD克隆。

棉铃虫核型多角体病毒mRNA的快速制备与体外翻译

吴金炉, 刘润忠, 张友清

1996, 11(2): 183

棉铃虫核型多角体病毒mRNA的快速制备与体外翻译吴金炉,刘润忠,张友清(中国科学院武汉病毒研究所,武汉430071)关键词棉铃虫核型多角体病毒,mRNA,快速制备,体外翻译,ELISA在昆虫杆状病毒mRNA的结构与功能研究方面,主要是以AcNPV为研...

韭菜病毒分离物初步鉴定

房德纯, 王振东, 佟成富, 陆庆轩

1996, 11(2): 187

韭菜病毒分离物初步鉴定房德纯,王振东,佟成富,陆庆轩(沈阳农业大学植保系,沈阳110161)(辽宁省风沙地改良利用研究所,阜新123000)(沈阳市园林科学研究院,沈阳110015)关键词韭菜病毒病,毒原鉴定,韭菜萎缩病毒1993年在辽宁省阜新市韭菜...