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1998年13卷2期

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Review

用于基因治疗的病毒载体

刘子夜, 齐义鹏, 王业富

1998, 13(2): 101

近几年来,基因治疗研究发展迅速,目的是将外源基因导入靶细胞,在体内产生疗效。早在1990年美国NIH的研究人员就将腺苷脱氢酶(adenosinedeaminase,ADA)基因导入病人的淋巴细胞,改善了由于ADA基因缺损造成的免疫缺陷.

RNA病毒RNA聚合酶的研究进展

丁清泉

1998, 13(2): 107

自然界仅有RNA病毒以RNA作为基因载体。依赖于RNA的RNA聚合酶在这种病毒的增殖复制期起到了非常重要的作用。它一方面以病毒RNA为模板复制子代病毒的基因,另一方面也将病毒增殖期间需要的蛋白质和酶类的基因转录成为mRNA,也就是说它担负了复制酶和转...

真菌传棒状病毒的分类及其特性

陈剑平, 陈炯, 程晔

1998, 13(2): 114

大约有11种棒状病毒,由根瘤菌纲土栖真菌(PlasmodiophoraceousSoilInhabitingFungi)传播(详见表1)。

乙型肝炎病毒adr亚型X蛋白在大肠杆菌中的高效表达

房德兴, 周宗安, 翟春生, 顾志香, 王元伦, 何亮

1998, 13(2): 122

将adr亚型HBV的完整X基因克隆到表达质粒pProEXHTb中,实现了X蛋白在大肠杆菌中的高效融合表达。表达产物全长179个氨基酸残基(其中X蛋白部分154个氨基酸残基),分子量约19.7kD,约占细菌总蛋白的34%。其氨基端融合部分含有6组氨酸肽段,经HisTrapTM亲和层析纯化,一步可达纯度93%。Western印迹分析表明,该表达产物可与HBV感染患者体内的抗X抗体特异性结合。

丙型肝炎病毒免疫电镜的初步研究

王理富, 李德富, 郎淑慧, 尹红章, 冯建平

1998, 13(2): 132

采用组织匀浆免疫沉淀后负染、免疫组化块染后包埋、原位包埋等免疫电镜技术,研究丙型肝炎病毒(HCV)。组织匀浆、免疫沉定、负染后在电镜下观察到与HCV相关的类病毒颗粒,形态与披膜病毒相似,大小多在55~65nm,圆形,有包膜,边缘略有突起或比较平滑,有胶体金结合在此种颗粒上及其周围。无关单抗阴性对照无类似颗粒及胶体金。免疫酶染电镜下还见到成堆可疑颗粒。此外,HCV-E区抗原染色后原位包埋,尚发现胶体金大多结合于大小50nm左右圆形结构的内部,表明E区单抗针对的特异性抗原位点位于这种结构的内侧。

人白细胞介素-18基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

徐东刚, 牛建章, 孟宗达, 逯好英, 陈淑芬, 崔泽, 朱会宾, 孟文华

1998, 13(2): 138

利用反转录PCR(RTPCR)法从人肝组织中分离人白介素18(hIL18)基因。克隆到Tvectoreasy载体中,经酶切初步鉴定后进行DNA序列分析,结果表明与文献报道完全一致。以pBV220为表达载体,在大肠杆菌中高效表达了hIL18基因,重组蛋白占菌体总蛋白的27.2%。为进一步研究其生物活性奠定了重要基础。

中国棉铃虫核型多角体病毒几丁质酶基因的定位与克隆

彭辉银, 李星, 张双民, Basil M. Arif, 陈新文, 胡志红

1998, 13(2): 139

以α32PdATP标记含CfMNPV几丁质酶基因的重组质粒为探针,在68℃条件下对棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒(HaSNPV)进行Southern杂交,将HaSNPV的几丁质酶基因分别定位在BamHIE、BglⅡE、EcoRIG、HindⅢF、XbaIH、BamHI+HindIIM和BamHI+XbaIH,并以pTZ19R为载体获得了XbaIH片段克隆。

棉铃虫核型多角体病毒Hind III-K片段的核苷酸序列及其分析

张传溪, 孙建新, 姜育蕾, 胡萃, 吴祥甫

1998, 13(2): 149

测定了棉铃虫(Helicoverpaarmigera)核型多角体病毒(HaSNPV)基因组DNA的HindIIK片段核苷酸序列。该片段全长3255bp,含可编码大于40个氨基酸残基的多肽的开放阅读框(ORF)15个,包括多角体蛋白(ph)基因编码区3′端489bp和蛋白激酶HavPK基因编码区801bp。在ph和HavPK两基因之间鉴定出一个可编码412个氨基酸残基的ORF1236,转录方向与ph和HavPK基因相反。同源分析表明,ORF1236与谷实夜蛾(Helicoverpazea)核型多角体病毒(HzSNPV)的ORF8推导的蛋白氨基酸序列有95.9%同源性,与苜蓿丫纹夜蛾(Autographacalifornia)核型多角体病毒(AcMNPV)ORF1629只有24.8%同源性,但三者均含有二组由多个脯氨酸残基串联而成的特征基序。

番茄花叶病毒外壳蛋白基因及3′端非编码区的克隆、序列分析及其表达

薛朝阳, 周雪平, 刘勇, 李德葆

1998, 13(2): 150

根据已报道的番茄花叶病毒L株系(ToMVL)序列人工合成引物,经RTPCR扩增并克隆了我国番茄花叶病毒分离物(ToMVS1)的外壳蛋白CP基因及3′端非编码区。序列测定结果表明,所得cDNA共长682个核苷酸,其中CP基因含480个核苷酸,编码158个氨基酸,3′端非编码区含202个核苷酸,其核苷酸序列与ToMVL株系具有99.5%的同源率。将该基因片段克隆到pGEMEX1载体中,转入E.coli后诱导表达,经Westernblot检测证明,该基因已在大肠杆菌中正确表达。这是我国首次报道ToMVCP基因序列。

生物素标记寡核苷酸探针检测B群轮状病毒

刘明军, 王正党, 王升启

1998, 13(2): 159

用5′端接氨基标记法,用生物素对B群轮状病毒(GBRV)IDIR株具有群特异性的3片段基因上23bp寡核苷酸序列进行标记,经高效薄层层析板(HPTLC)纯化,制备了B群轮状病毒生物素寡核苷酸探针,探针显色灵敏度达10Pg,与GBRV、KB63株基因杂交可检测到100pg靶序列,而与A群和C群轮状病毒及无关基因均不产生杂交信号,该探针可用于B群轮状病毒的检测、鉴定,以及同群不同毒株间基因相关性研究。

减蛋综合征病毒100K蛋白基因的克隆与序列分析

李茂祥, 金奇, 章金钢, 曾力宇, 姚二梅, 殷震, 侯云德

1998, 13(2): 160

用常规方法提取减蛋综合征病毒(EDSV)中国分离株(AA2株)病毒DNA,分别构建了限制性内切酶HindⅢ、SphⅠ、PstⅠ水解片段的全基因文库,并对其中100K蛋白基因的序列进行了分析。EDSV100K蛋白基因位于减蛋综合征病毒基因组55.7~64.8物理图谱单位(m.u),共2091个核苷酸(nt),其编码产物由696个氨基酸(aa)组成,推测其分子量为77.7kD。编码蛋白氨基酸同源性分析表明,EDSV100K蛋白与人腺病毒(Ad2、Ad5、Ad12、Ad41)、Ⅰ群禽腺病毒(CELO和FAV10)的同源性为32.3~34.4%之间,而与羊腺病毒(OAV)的同源性达到56.4%。

庚型肝炎病毒——中国河北分离株部分NS3区基因序列分析

徐东刚, 逯好英, 牛建章, 韩风连, 高新

1998, 13(2): 166

在急慢性输血后肝炎、散发性肝炎及爆发型肝炎中,大约10~20%的病人不属于已发现的A~E型肝炎,提示存在新型肝炎病毒。在美国1995年第46届医学年会上,已有了一些有关庚型肝炎病毒(HGV)分子生物学及庚型肝炎血清学方面的摘要报道。1996年初Lin...

矮牵牛病毒病的初步研究

周正来, 陆仕华, 袁贤溶, 汪树俊, 黄济明, 蒋震同

1998, 13(2): 173

矮牵牛是一种草本花卉,主要用来布置花坛,但病毒侵染却严重地影响其观赏价值。国内外有关危害矮牵牛的病毒报道较多[1,2],但较系统研究矮牵牛病毒病的报道较少,本文从矮牵牛病毒鉴定、优势病毒种类确定及防治矮牵牛病毒病进行了初步研究.

毛细管气相色谱分析昆虫病毒包涵体中的脂肪酸

朱湘民, 郑大胜, 汤显春, 夏祥明, 宋冬林

1998, 13(2): 174

病毒脂肪酸的定性和定量,可作为病毒分类鉴定的辅助证据。有关细胞脂肪酸的研究已有报道[1~2],但对病毒多角体(polyhedrons)和颗粒体(granules)中脂肪酸成份的研究尚未见报道。本研究在病毒单糖分析的基础上[3],用毛细管气相色谱法,对...

庚型肝炎病毒NS5区蛋白鼠单克隆抗体的制备

陈万荣, 周育森, 徐静, 刘树玲, 王海涛

1998, 13(2): 179

庚型病毒性肝炎是近年来世界上才确认的一种新型肝炎[1~3]。庚型肝炎病毒(HGV)呈世界性分布,经血液传播为主,也可母婴传播。HGV容易形成持续性感染,类似HIV和HCV。据粗略估计,我国大约有100万~1000万HGV携带者。因此,HGV已成为继乙...

一株丙型肝炎病毒缺陷株NS5A基因片段的序列分析

朱分禄, 逯好英, 孟庆华, 戚中田

1998, 13(2): 182

Q丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的一种严重的传染病。丙型肝炎病毒主要通过输血和应用不洁的血液制品传播,所以利用敏感、特异的检测方法筛选献血员对丙型肝炎的预防尤为重要。现在第二代HCV检测试剂已大批应用,加入NS5A抗原的第三代试剂也正在研制中...